 |
|
|
Ализариновый красный С металлохромный индикатор. С его помощью в гистохимии выявляется локализация ионов кальция и железа. Из курса неорганической химии для студентов известно, что классический химический метод выявления алюминия, железа, цинка на фильтровальной бумаги, при котором используется спиртовой раствор ализарина, а затем исследуемый материал помещают в пары аммиака ( Например Иванов А.В. Методическое руководство по качественному и количественному анализу для студентов 2 курса географического факультета. - Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова Химический факультет Москва 2001.- 33 с.). По данным литературы "М.Т. Луценко Микроскопическая и гистологическая техника Благовещенск.-1976." фиксация в спирт -формалине рекомендована для исслдеования органов дыхания. По данным Кост Е.А. спиртовый раствор брилианткрезил блау рекомендован для витального окрашивания ретикулоцитов крови в пробирке. Мы проводиле фиксацию легких в 90 процентном по массе этиловом спирте при суправитальное окрашивание тонких кусочков легких ализариновым красным С проводилась в 5% спирт-аммиачном растворе ализаринового красного С. Окраска проводится при комнатной температуре на протяжении 24 часов (эмпирика). После получения срезов на замораживающем микротоме, срезы приклеиваются на желатинизированные предметные стекла, затем их необходимо на 5 минут поместить в пары аммиака, затем микроскопировать. Концентрация аммиака в спиртовом растворе при суправитальной и витальная окраска ализарином красным С рассчитывается с учетом рекомендаций Ещенко Ю.В. для окрашивания ионов цинка дитизоном. Для приготовления основного 1%-го водно-аммиачного раствора дитизона для инъекций в колбу с притертой пробкой наливали 45 мл дистиллированной воды, добавляли 0,9 мл 25%-го раствора гидроокиси аммония и 600 мг дитизона. Смесь перемешивали на водяной бане (70 °С) в течение 10 мин, затем фильтровали через беззольный фильтр. Рабочий 0,2%-й раствор дитизона для цитохимических исследований готовили пятикратным разбавлением дистиллированной водой основного раствора. Поскольку дитизон растворим в воде при щелочных значениях среды, для его растворения воду подщелачивали раствором гидроокиси аммония. Известно, что водно-аммиачный раствор, на основе которого изготавливался раствор дитизона не вызывает изменений в клетках [Действие хелатирующих агентов на предстательную железу у крыс Ещенко Ю.В.1, Новицкий В.В.2, Бовт В.Д.1, Ещенко В.А.1, Уразова О.И.].//Бюллетень сибирской медицины, № 3, 2010 ]. Мы эту методику применили для окрашивания на цитологических препаратах микробов содержащихся в мокроте, слюне. Учитывая данные литературы, и наши результаты исследования, мы считаем, что использование аммиака в процессе фиксации органов, тканей клеток исправит недостатки известных методов фиксации
|
|
